D-熒光素鈉鹽、D-蟲熒光素鈉;103404-75-7;
D-熒光素鈉鹽、D-蟲熒光素鈉 103404-75-7
D-熒光素鈉
通用名：D-冷光素鈉鹽、D-蟲熒光素鈉
化學(xué)名稱：4,5-二氫-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-4-噻唑羧酸鈉；(S)-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-2-噻唑啉-4-羧酸鈉；(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鈉鹽
分子式：C11H7N2NaO3S2
分子量：302.3
儲(chǔ)存條件：-20°C
溶解度：溶于水
外觀：橙紅色粉末
CAS號(hào)：103404-75-7
分子式：C11H7N2NaO3S2
分子量：302.3
純度：≥99%
保存：-20℃
D-熒光素鈉鹽產(chǎn)品說明：
D-熒光素(D-Luciferin)是螢火蟲熒光素酶底物，其量子效率為0.88，是Luminol的20倍。反應(yīng)原理為鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應(yīng)，接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測(cè)定細(xì)胞活力以及細(xì)菌計(jì)數(shù)。它還用于報(bào)告基因檢測(cè)。可與小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)配套使用，用于標(biāo)記LUC基因后的體內(nèi)活體熒光檢測(cè)。也應(yīng)用于體外分析，高通量測(cè)序和各種污染檢測(cè)。
D-熒光素有三種產(chǎn)品形式，D-熒光素(D-Luciferin,free acid)、D-熒光素鉀鹽(D-Luciferin,potassium
salt)和D-熒光素鈉鹽(D-Luciferin,sodium
salt)，三種形式都易溶于水，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實(shí)質(zhì)性的差別。它們的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為328nm和533nm。
使用方法(僅供參考)：
(一)活體成像分析方法
1.用DPBS(不含Mg2+、Ca2+)配制15mg/mL的D-Luciferin工作液，0.2μm濾膜過濾除菌。
2.注射量10μL/g的體重，如10g重小鼠，注射100μL工作液(1.5mg D-Luciferin)。
3.腹腔注射10～15分鐘后，上機(jī)進(jìn)行圖像分析。
(二)體外分析方法
1.用無菌水配置200×的D-Luciferin儲(chǔ)備液(30mg/mL)，立即使用，或-20℃保存。
2.用預(yù)熱好的完全培養(yǎng)基1:200稀釋D-Luciferin儲(chǔ)備液，配制150μg/mL工作液。
3.去除細(xì)胞培養(yǎng)基。
4.向細(xì)胞中添加1×的D-Luciferin工作液，37℃孵育5～10min，進(jìn)行圖像分析。
注意事項(xiàng)：
1.鈣鎂離子可能會(huì)抑制熒光素酶的活性，鎂離子可能會(huì)對(duì)熒光素的氧化造成影響，溶解D-Luciferin應(yīng)使用無鈣鎂離子的PBS，且要完全溶解。
2.本品要進(jìn)行避光操作和保存。儲(chǔ)存液過濾除菌后可分裝于-20℃或-80℃凍存。
3.動(dòng)物類型體重，以及注射方式都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射，建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，確定最佳信號(hào)平臺(tái)期和最佳的檢測(cè)時(shí)間。
4.在體外圖像分析前，將細(xì)胞進(jìn)行37℃的短時(shí)間培養(yǎng)可以增加信號(hào)強(qiáng)度。
5.進(jìn)行ATP的檢測(cè)，盡量避免外源ATP的污染。
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